广州辉骏生物科技有限公司  

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一、microRNA表达载体构建概述：
    MicroRNA(miRNA)是一类小单链RNA,长度为18-25个核苷酸。编码miRNA的基因转录出长链的初始miRNA(pri-miRNA)后被Drosha核糖核酸酶切割形成pre-miRNA, pre-miRNA通过Exportin 5从细胞核转运到细胞质中，在细胞质中，核糖核酸酶Dicer切割pre-miRNA释放出约22nt长的不完全互补的miRNA双链后被进一步被加工成单链miRNA, 行使其功能。

      图1：microRNA作用机理 

     本公司提供miRNA载体构建技术服务，其原理是主要是将pre-miRNA序列插入到启动子后面，在细胞中转录出pre-miRNA后进一步被加工成miRNA，行使其功能。

二、与化学合成的microRNA相比，microRNA表达载体具有以下技术优势
 1、microRNA表达载体是DNA，更加稳定，易控制；
  2、含有GFP的microRNA表达载体可以更好的监测转染效率；
 3、microRNA表达载体上带有筛选标签及筛选抗性基因，可用于稳定细胞系的建立。

三、技术服务内容
  1、Pre-miRNA序列查询，编码Pre-miRNA的序列获取；
  2、空载体和插入酶切、连接、转化及克隆鉴定；
 3、microRNA表达载体技术服务报告提交。

四、客户提供
  1、客户自行设计的不同长度及不同形式的miRNA及相应的DNA,由本公司将其克隆到microRNA表达载体上。
  2、客户可以提供miRbase数据库中的miRNA编号，由本公司将其克隆到microRNA表达载体上。

五、实验服务报告内容
  1、microRNA表达载体及含该质粒的细菌各一份；
  2、载体图谱和测序结果各一份；
  3、构建microRNA表达载体技术服务所需试剂耗材、仪器设备、实验步骤各一份。

六、实验服务周期及收费标准：咨询本公司。

七、质量承诺：保证构建的microRNA表达载体能在体内转录形成相应的microRNA。