全机型通用荧光定量试剂

2xRealabGreenPCRFastmixture通用型产品简介  

TaqSYBR®GreenqPCRPremix是SYBR®GreenI嵌合染料法好qPCR试剂，为2×预混液，包含除引物和DNA样品以外的所有qPCR组分，可减少操作步骤，缩短加样时间，降低污染几率。其核心组分是经抗体修饰的热启动TaqDNA聚合酶，配合精心优化的Buffer体系以及PCR反应促进因子，使产品具有特异性强、扩增效率高等特点，有效抑制非特异性扩增，可对宽广浓度范围的模板进行准确定量，获得稳定可靠的qPCR结果。  

2xRealabGreenPCRFastmixture通用型使用方法：  

1.适配机型  

全机型通用  

2.使用注意  

①因Mix中预混有染料，其保存或反应体系配制过程应避免强光照射；  

②使用前上下颠倒轻轻混匀Mix，请勿涡旋振荡混匀，避免产生过多气泡。  

5.实验优化  

若使用默认反应条件反应性能不佳时，则需要进行反应条件的优化，可以从引物浓度以及扩增程序两个方面进行：  

①引物浓度调整  

当引物终浓度在0.1~1.0uM范围之间变化时，引物浓度越低，扩增特异性越高，但扩增效率会有所下降。  

②扩增程序优化  

需提高扩增特异性，可使用两步法程序或提高退火温度；需提高扩增效率，可使用三步法程序或延长延伸时间。  

6.引物设计原则  

①扩增产物长度建议控制在80~200bp；  

②引物长度为18~25bp；  

③正向引物和反向引物的Tm值相差不超过1℃为佳，Tm值控制在58~62℃为佳；  

④引物的GC含量控制在40%~60%之间；  

⑤引物A、G、C、T整体分布尽量要均匀，避开T/C或者A/G的连续结构（特别是3'端）；  

⑥引物3'端好hou一个碱基好hao为G或者C；  

⑦避开引物内部或者两条引物之间的互补序列；  

⑧使用NCBIBLAST功能检索确认引物的特异性。  

15、全机型通用荧光定量试剂  

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https://www.chem17.com/st534943/product_37140546.html