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即用型低生长因子基底膜基质是从鼠肿瘤中提取的可溶性基底膜。这种预稀释的基质可直接从冰箱中取出并分装到细胞培养板中,无需进一步处理。该基底膜基质可以用于无饲养层(feeder-layerfree)法培养人胚胎干细胞(hESCs)和诱导多功能干细胞(iPSCs)。其会在37°C形成重组基底膜。同时,该基底膜基质也包含多种生长因子,例如表皮生长因子EFG,血小板衍生生长因子PDGF,神经生长因子NGF,碱性成纤维细胞生长因子FGF-2,乙型转化生长因子TGF-beta和胰岛素样生长因子ILGF。ESTrex即用型低生长因子基底膜基质已经过验证,可支持hESCs和iPSCs的生长。
本品具有良好的一致性,按1:100的浓度预稀释,确保好佳的干细胞蛋白浓度附着于标准细胞培养板。可以在4°C下储存避免了在冰上进行过夜解冻,减少了多个制备步骤和可能的产品失败。每个批次都使用人胚胎干细胞经过功能测定,并经过测试确保其不含乳糖脱氢酶升高病毒(LDEV),从而可在实验室进行安全的细胞培养。
操作方法:
人胚胎干细胞hESC和诱导多能干细胞iPSCs无饲养层培养法
1.将4°C预冷的即用型低生长因子基底膜基质溶液均匀铺开并wanquan覆盖培养板。推荐即用型低生长因子基底膜基质的量为300µL/cm2。
2.将含有即用型低生长因子基底膜基质的培养板在室温静置一小时。
3.吸掉即用型低生长因子基底膜基质,并在培养板上立即种上干细胞与培养基(mTeSR1)混合液。注意一定不要让修饰过的培养板表面变干。
注意事项:
产品所含基质胶成分在温度高于10°C时就会开始凝固成胶,所以尽量在冰上操作。操作完,尽快放回2-8°C冰箱。
12、基质胶matrigel
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