2xRealabGreenPCRFastmixture通用型产品简介
TaqSYBR®GreenqPCRPremix是SYBR®GreenI嵌合染料法好qPCR试剂,为2×预混液,包含除引物和DNA样品以外的所有qPCR组分,可减少操作步骤,缩短加样时间,降低污染几率。其核心组分是经抗体修饰的热启动TaqDNA聚合酶,配合精心优化的Buffer体系以及PCR反应促进因子,使产品具有特异性强、扩增效率高等特点,有效抑制非特异性扩增,可对宽广浓度范围的模板进行准确定量,获得稳定可靠的qPCR结果。
2xRealabGreenPCRFastmixture通用型使用方法:
1.适配机型
全机型通用
2.使用注意
①因Mix中预混有染料,其保存或反应体系配制过程应避免强光照射;
②使用前上下颠倒轻轻混匀Mix,请勿涡旋振荡混匀,避免产生过多气泡。
5.实验优化
若使用默认反应条件反应性能不佳时,则需要进行反应条件的优化,可以从引物浓度以及扩增程序两个方面进行:
①引物浓度调整
当引物终浓度在0.1~1.0uM范围之间变化时,引物浓度越低,扩增特异性越高,但扩增效率会有所下降。
②扩增程序优化
需提高扩增特异性,可使用两步法程序或提高退火温度;需提高扩增效率,可使用三步法程序或延长延伸时间。
6.引物设计原则
①扩增产物长度建议控制在80~200bp;
②引物长度为18~25bp;
③正向引物和反向引物的Tm值相差不超过1℃为佳,Tm值控制在58~62℃为佳;
④引物的GC含量控制在40%~60%之间;
⑤引物A、G、C、T整体分布尽量要均匀,避开T/C或者A/G的连续结构(特别是3'端);
⑥引物3'端好hou一个碱基好hao为G或者C;
⑦避开引物内部或者两条引物之间的互补序列;
⑧使用NCBIBLAST功能检索确认引物的特异性。
15、全机型通用荧光定量试剂
http://www.lablead.com.cn/SonList-2377345.html
https://www.chem17.com/st534943/product_37140546.html







