3D细胞培养基质胶选择与注意事项

 
 
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更新 2025-11-20 19:02
 
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详细说明

3D细胞培养基质胶是一种从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取的天然生物材料,能够模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能,为细胞提供接近生理状态的三维生长环境


一、核心成分与作用机制

1.主要成分

①结构蛋白:层粘连蛋白、Ⅳ型胶原蛋白、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白等,构成细胞外基质(ECM)的骨架。

②生长因子:如表皮生长因子(EGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、神经生长因子(NGF)、碱性成纤维细胞生长因子(FGF-2)、转化生长因子-β(TGF-β)等,调控细胞增殖、分化和迁移。

③基质金属蛋白酶:参与ECM的动态重塑,影响细胞行为。

2.作用机制

①物理支撑:为细胞提供三维空间结构,支持细胞粘附、铺展和迁移。

②信号调控:通过生长因子和ECM成分与细胞表面受体结合,激活细胞内信号通路,调控细胞增殖、分化和功能。

③微环境模拟:还原体内细胞外基质的复杂环境,促进细胞间相互作用和细胞-基质相互作用。


二、3D细胞培养基质胶使用方法

1.融化与稀释

①融化:将基质胶置于4℃冰箱过夜融化,避免直接加热或剧烈震荡。

②稀释:用预冷的培养基或PBS稀释基质胶至所需浓度。

2.包被培养板

①薄层包被:将稀释后的基质胶加入预冷的细胞培养板中,37℃孵育60分钟使其凝固,用于原代细胞增殖或Transwell实验。

②夹心包被:先铺一层基质胶,接种细胞后,再覆盖一层基质胶,模拟复杂体内微环境,适用于药物筛选和组织工程。

③包埋法:将细胞或类器官碎片悬浮于基质胶中,形成圆顶小液滴(如50μL)后37℃孵育凝固,用于3D细胞球或类器官培养。

3.细胞接种与培养

①将悬浮的细胞接种到基质胶包被的培养板中,加入培养基后置于37℃、5% CO₂培养箱中培养。

②定期观察细胞形态和生长情况,根据实验需求更换培养基或进行后续处理。


三、3D细胞培养基质胶选择与注意事项

1.产品类型

①标准型基质胶:含正常浓度生长因子,适用于一般3D细胞培养和肿瘤侵袭实验。

②低生长因子型基质胶:去除非必需生长因子,减少实验背景干扰,适合类器官培养和干细胞分化等需要精确调控的场景。

③无酚红型基质胶:避免酚红对荧光检测或pH判断的干扰,适用于需要精确监测细胞状态的实验。

④无LDEV型基质胶:减少生物安全风险,确保实验安全性。

2.质量控制

①无菌测试:通过31种生物体检测及USP无菌测试,内毒素≤8 EU/mL。

②功能验证:每批次产品均通过人/鼠内皮细胞成管实验,确保促血管生成活性的一致性。

③储存条件:基质胶需储存于-20℃或-80℃,避免反复冻融,分装后使用可降低实验成本损耗。

3.操作技巧

①低温操作:基质胶在4℃以下为液态,22℃至37℃快速成胶。操作时需保持低温,避免提前凝固。

②避免气泡:铺胶时动作轻柔,避免产生气泡影响细胞生长。

③凝胶状态维持:基质胶在培养基中可维持凝胶状态14天以上,但需定期观察培养基pH和细胞状态,及时更换培养基。


更多产品信息来源:http://www.gzynsw.com/Products-38607724.html

https://www.chem17.com/st505229/product_38607724.html


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